PRÁCTICA 7.- fecha: 19/02/2016
•DETERMINACIÓN DE SULFATOS:
- OBJETIVO:
Conseguir
una recta de calibrado midiendo la absorbancia a 650 nm de solución patrón.
Medir el agua de muestra.
- FUNDAMENTO:
La práctica
se basa en realizar la medición de 6 tubos de muestras a diferentes
concentraciones mediante el espectrofotómetro para calcular la absorbancia de
éstas y más tarde realizar la recta de calibrado.
- MATERIALES Y REACTIVOS:
- 2 Vasos de precipitado
- 3 pipetas
de 10ml
- Cristal de
reloj
- Prepipeta-
Mortero
- Embudo
- Probeta
- Pipeta
Pasteur
- Papel de
filtro
- H2SO4 (ácido sulfúrico)
- BaCL2 (cloruro de bario)
- PROCEDIMIENTO:
- Se prepara
la disolución madre de BaCL2 a 0,0962N y
disolución madre de H2SO4 a 0,2N necesarias para las muestras.
- Se cogen 6
tubos de ensayo junto con una gradilla para colocarlos y se enumeran para
evitar confusiones.
- En el
primero vertimos 6ml de H2O destilada, la cual nos sirve para el
calibrado y tarar a 0 el aparato.
- Los demás
tubos van a diferentes concentraciones, menos el último que se llena con otros
6ml de H2SO4.
- También utilizamos otros 2 tubos para
el agua de muestra.
- Cuando
tenemos todas las muestras preparadas para la medición, nos dirigimos al
espectrofotómetro.
- Se
enciende y se deja un rato para que se caliente y realice su proceso de
calibrado y lo calibramos a absorbancia de 650nm.
- Empezamos
a colocar los tubos siempre en el primer hueco. Primero el tubo número 1, y
pulsamos para calibrar y tarar a blanco. Luego empezamos desde el final, osea
desde el 6 hacia el 2, para intentar lo mínimo posible contaminar las demás
mediciones.
MÉTODOS
ESPECTROFOTOMÉTRICOS
Las
partículas cuando interaccionan con un haz de luz tienen la capacidad de
absorber la energía y excitarse. Los cambios que se produzcan en la partícula
dependerán de la naturaleza de la propia partícula y de la energía de la luz
incidente.
Cada especie
absorbente (cromógeno) tiene un espectro de absorción característico. Este
espectro representa la relación entre la longitud de onda (lambda λ) incidente y la absorbancia.
Los espectros de absorción por tanto son de utilidad para
seleccionar la longitud de onda (lambda λ) más
adecuada para una medición de una sustancia determinada.
La relación entre la luz incidente y la luz transmitida se
denomina transmitancia.
Multiplicando por 100 obtenemos el porcentaje de
transmitancia.
En la práctica se usa el valor de absorbancia en lugar
de transmitancia.
A=2-log(%Tª)
La relación matemática entre la absorbancia y el porcentaje
de transmitancia va de 0 a 100;si el porcentaje de transmitancia es 100 la
absorbancia es 0.
%Tª va de 0 a 100;si %Tª=100→A=O
A va de ∞ a 0;si % Tª=0→A=∞
Para evitar la interacción por parte del disolvente o de la
cubeta se hace una medida previa que será el blanco para eliminar dichas interferencias.
Todas las medidas que se hagan con posterioridad serán referidas a esta medida
inicial y se deben hacer en la misma cubeta que el blanco.
LEY DE
LAMBERT-BEER
La ley de
Lambert-Beer establece la relación entre la absorbancia de una solución y la
concentración de sustancia absorbente y la longitud que recorre la luz a través
de la solución.
A=E x C x L
A=absorbancia
E=épsilon, coeficiente de extinción molar (mol x cm)
C=concentración del absorbente (M)
L=longitud del paso de luz (cm)
La
concentración es lo que va a variar.
Esta
ecuación constituye la base del análisis cuantitativo por espectrofotometría,
épsilon (E) es el coeficiente de absorción molar, es una constante para un
compuesto dado si no se varían las condiciones de longitud de onda, de PH, de
Tª, etc…
La longitud
del paso de luz dependerá de la cubeta que utilicemos. Suele ser de 1 cm2
La ley de
Lambert-Beer se cumple para soluciones diluidas ya que con valores de
concentración altos épsilon varía debido a fenómenos de dispersión de la luz,
agregación de moléculas, etc.
PARTES DE UN
ESPECTROFOTÓMETRO
1-Lámpara
2-Rejilla de entrada
3-Rejilla de difracción o prisma
4-Rejilla de salida o monocromador
5-Cubeta
6-Sensor o detector
7-Pantalla digital
Las lámparas
que se suelen utilizar son:
-Túngsteno:
emite visible y UV cercano
-Halógenas:
emite visible y UV cercano, mayor int
-Hidrógeno y
deuterio: UV (220-340 nm)
RECTA DE
CALIBRADO
Consiste en
medir la absorbancia de distintas soluciones de concentración conocida de una
determinada sustancia para elaborar una recta en la cual podamos extrapolar la
concentración de muestras desconocidas.
Absorbancia no tiene unidades.
Transmitancia se mide
en %.
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