Recuento aerobios mesófilos por filtración

RECUENTO AEROBIOS MESÓFILOS POR FILTRACIÓN

PRÁCTICA 9

1.- OBJETIVO:

Recuento de aerobios mésofilos presentes en el cultivo PCA y hacer la siembra mediante filtración
con kitasato.

2.- FUNDAMENTO:

Filtración al vacío mediante un kitasato para hacer pasar por un filtro de poro 0,45mm el agua y se retenga en el los microorganismos que queremos sembrar en el medio de cultivo PCA.

3.- PROCEDIMIENTO:

1.- Preparamos el lugar de trabajo montando el matraz kitasato con sus partes y el aparato de vacío. También encendemos el mechero bunsen ya que necesitamos condiciones de esterilidad.

2.- Con el agua muestra ya preparada, echamos en un vaso de precipitado alcohol para cuando tengamos que flamear las pinzas y en la placa Petri estéril ponemos agua destilada estéril para dejar el filtro que vamos a usar y que se despegue sola la parte sobrante.

3.- Flameamos primero las pinzas con cuidado para coger el filtro y lo pasamos a la placa Petri con el agua estéril hasta que se despegue bien el trozo sobrante del filtro.

4.- Ponemos el filtro encima del Kitasato y cerramos con el embudo para filtrar. Ponemos las pinzas de seguridad para que no se vaya a caer el embudo y hacer mejor la filtración.

5.- Encendemos la bomba de vacío, el agua irá pasando por el filtro, en este paso asegurarnos que todo el aparato de filtrado está bien apretado sino la aspiración será escasa y tardará más (como ya nos ocurrio).

6.- Al terminar retirar pinzas de sujeción, embudo y coger el filtro con las pinzas (previamente esterilizadas).

7.- Se deja el filtro en la placa Petri del medio PCA lentamente para no hacer burbujas entre el medio y el filtro.

8.- Rotular la placa con los datos necesarios sobre el recuento que se está realizando, fecha y persona.

9.- Guardar el cultivo boca abajo en la estufa y a una temperatura de 35-37ºC por ser mesófilos.

4.- MATERIALES:

- Mechero

- Vasos de precipitado (agua destilada estéril, agua muestra, alcohol)

- Embudo

- Probeta 100 ml

- Pipeta Pasteur

- Matraz Kitasato

- Alcohol

- Agua Destilada Estéril

- Placa Petri estéril

- Pinzas

- Mechero Bunsen

- Filtro reticulado

5.- RESULTADOS:

Las colonias no se podían contar porque se encontraban muy juntas.